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实验室检查

1、精液分析  精液质量可反映睾丸精子发生及附属性腺功能是否正常。精液分析可为不育病因的诊断、疗效的判定提供客观依据。精液分析也有其局限性、人为误差、和个体标本间的差异常影响结果的精确性。因此,精液分析的标准化,才能得出正确的诊断。

(1)精液收集的要求:禁欲3~5天、手淫取精、容器无毒、20分钟内送检(保温);

(2)精液的物理学检查:

①精液的凝固和液化

②气味  正常精液有类似栗子花的气味,这是由于精氨氧化缘故。

③颜色  正常为灰白色,长期禁欲者可呈淡黄色。生殖道感染有大量白细胞存在时,可呈白色或黄色。生殖道出血可引起红色血精。

④粘稠度  待精液完全液化后测定。用吸管轻轻吸入一些精液,让精液依重力滴下,正常精液流出时应为不连续的小滴,异常时液滴连贯成大于2cm的黏液丝。

⑤精液量  正常为2-6ml,平均3.5ml。少于1.5 ml或大于8ml均视为异常。

⑥pH(酸碱度)   正常pH值的范围为7.2~8.0。

(4)精液的分析方法

①    人工显微镜和计算机辅助精子分析二种

②    分析内容

精子的凝集、精子活动率、精子存活率、精子活动力(分a、b、c、d级)、精子计数和精子密度、精子形态、精液中的生精细胞和非精子细胞成分。

2、精子核的染色

用苏木精-伊红染色法能很好的显示精子核的形态,便于镜检观察。

原理:带正电荷的碱性染料苏木精与带负电荷的核酸结合使精子细胞核染成紫蓝色,酸性染料伊红则将细胞质中带相反电荷的蛋白质染成紫红色。

3、精子核DNA染色

DNA是生物体的遗传物质,具有贮存、传递遗传信息,控制分化和发育的作用。DNA分子是由两条多核苷酸链互相缠绕而成的双螺旋结构,只有含完整的的双链DNA精子才具有受精能力。

原理:荧光染料吖啶橙与精子核中双链DNA结合后在荧光显微镜下发出绿色荧光,而与单链DNA结合则发出红色或黄色荧光。

4、精子功能分析

精子功能分析能评价精子的受精能力,尤其对不明原因不育症的分析有着重要的诊断意义。

(1)性交后试验(PCT)  观察性交后数小时内宫颈黏液中活动精子数和活动力,同时了解宫颈黏液的质量。

(2)体外精子-宫颈黏液穿透试验   有玻片法和毛细玻管法二种,观察精子的穿透能力,有助于分析宫颈黏液的质量及精子的运动能力,以鉴别不育症的原因。

(3)精子-去透明带仓鼠卵穿透试验   获能后的精子具有穿透去透明带仓鼠卵的能力。根据有精子穿入的乱子数和穿入卵子的精子数来判断精子有无受精能力。

(4)精子尾低渗膨胀试验(hypo-osmotic swelling(HOS)test)   该膨胀现象是细胞膜功能的正常表现,而膜不完整或死精子则无膨胀现象。正常生育力男子的精子尾部膨胀率明显高于不育男子。

(5)人透明带或半透明带结合试验

此法是将取自不同来源的人卵母细胞显微切割两半,一半用于受试精子结合试验,另一半用正常精子为实验对照,分别用不同的标记,以便分别检测与透明带结合的结果。这种检测的阳性率与体外受精的成功率有较高的相关性。

(6)顶体反应检查

精子获能后,在一定诱导剂作用下,便能立即发生顶体反应,精子在穿过透明带与卵发生融合之前,必须经过顶体反应(先决条件)。它的实质是一种胞吐过程,顶体与透明带接触后首先形成一系列的小空洞,使顶体释放出一系列的酶以溶解卵子的放射冠和透明带。随后,经过一系列复杂过程,精子才得以与卵子结合完成受精。可通过以下几种方法来检测顶体反应:凝集素标记法、顶体酶活性测定法、透射电镜法、相差和微分子干涉相差显影术、重染色技术、荧光标记法等。

5、精子核蛋白组型转换分析

精子核成熟与核内碱性蛋白组型转换有关。若精子发生过程中核蛋白组型转换异常,可引起不育,即使受精,也有可能造成胚胎夭折。检测精子核蛋白组型变化,有助于了解精子核成熟的状况

6、精浆生化检测

精浆主要包括附睾、精囊腺和前列腺等分泌物,化学成分复杂,其特殊的理化性质为精子的生存、活动和受精能力提供了物质保证。检测精浆中某些生化成分,对于了解各附属性腺的功能,明确不育病因具有重要的意义。

7、精浆细胞因子的检测

精浆细胞因子由男性泌尿生殖道内的各种细胞分泌。包括转化生长因子、表皮生长因子、肿瘤坏死因子、各种白细胞介素及某些可溶性受体等。当前研究认为,与男性不育有关的细胞因子主要有白介素-6和白介素-8,不育者精浆中二值水平明显高于生育力正常的男性。

作者:彭弋峰教授 皖南医学院弋矶山医院 性医学科主任医师 

来源:好大夫在线

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